腺苷酸環(huán)化酶(adenylate cyclase, AC)是膜整合蛋白,它的氨基端和羧基端都朝向細(xì)胞質(zhì)。AC在細(xì)胞膜內(nèi)由兩個(gè)膜整合區(qū),每個(gè)膜整合區(qū)分別有6個(gè)跨膜的α螺旋。在細(xì)胞膜內(nèi)部細(xì)胞質(zhì)面有兩個(gè)催化結(jié)構(gòu)域,催化結(jié)構(gòu)域中有2個(gè)保留序列(conserved region)C1a, C2a,這兩個(gè)區(qū)域主要負(fù)責(zé)AC的活性。哺乳動(dòng)物中已發(fā)現(xiàn)9個(gè)腺苷酸環(huán)化酶異構(gòu)體。由于AC能夠?qū)TP轉(zhuǎn)變成cAMP,引起細(xì)胞的信號(hào)應(yīng)答,故此,AC是G蛋白偶聯(lián)系統(tǒng)中的效應(yīng)物。
腺苷酸環(huán)化酶主要分布于細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。它也是一種磷酸酶,能催化ATP形成3',5'-環(huán)磷酸腺苷(cAMP)并釋放出焦磷酸。Howell等人(1972)首先用亞胺二磷酸腺苷(AMP-PNP)作底物,成功地對(duì)動(dòng)物細(xì)胞中的腺苷酸環(huán)化酶進(jìn)行了定位?,F(xiàn)已確認(rèn),在未固定和固定的組織中,ATP-PNP是腺苷酸環(huán)化酶的專一性底物,在腺苷酸環(huán)化酶的作用下,能生成cAMP和PNP,后者與捕捉鉛離子反應(yīng),生成一種不溶性的電子密度很高的產(chǎn)物。但鉛能在一定程度上抑制酶活性,為克服這一缺點(diǎn), Fujiomto等(1981)設(shè)計(jì)了使用二鉀亞砜(DMSO)的硝酸鉛法。
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